如何利用恒温循环解冻箱加速制备血浆冷沉淀

阅读次数：1091 发布时间：2020/4/26 8:54:45

冷沉淀概念：

冷沉淀(cryoprecipitation;cryoprecipitate;cryoprecitation）是指血浆冷沉淀中含有Ⅷ因子及纤维蛋白原，可治疗缺乏Ⅷ因子及纤维蛋白原而出血不止的患者或血友病患者。融化后6h内输完，输速不低于200ml/h。适用于儿童及成人轻型甲型血友病、血管性血友病、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子XⅢ缺乏症病人。有时冷沉淀也用于手术后出血、严重外伤及DIC等病人的替代治疗。

冷沉淀临床应用

成分

每袋冷沉淀是由400 ml全血制成，体积为25 ml±5ml/袋，其中主要含有≥80IU的因子Ⅷ、纤维蛋白原≥150mg以及血管性血友病因子，纤维粘连蛋白、凝血因子ⅩⅢ等。

作用

补充凝血因子Ⅷ、vWF、纤维蛋白原、因子ⅩⅢ等。

有效期

在-20℃以下冻存，冷冻状态一直持续到使用之前，有效期从采血之日起为一年。

适应症

1、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症:对严重创伤、烧伤、白血病和肝功能衰竭等所致的纤维蛋白缺乏，输注冷沉淀可明显改善预后。

2、先天性或获得性凝血因子Ⅷ缺乏症:由于冷沉淀中含有较丰富的FⅧ，故常用作FⅧ浓缩剂的替代物。

3、血管性血友病(vWD):血管性血友病表现为血浆中vWF缺乏或缺陷。因冷沉淀中含有较高的FⅧ和vWF，所以 vWD替代治疗*理想的制剂是冷沉淀。

4、儿童及轻型成年人甲型血友病:甲型血友病的治疗主要是补充FⅧ，冷沉淀是除FⅧ浓缩剂外*有效制剂。

5、冷沉淀中含有纤维粘连蛋白(Fn)，术后输注可使伤口愈合快且很平整。

6、低血容量性休克并发DIC。

使用剂量

常用剂量为:每10kg体重输注1~1.5单位。

注意事项

1、应按ABO血型相容原则输注，不需做交叉配血。

2、输注前应在37℃水浴中10分钟内融化，融化过程中必须不断轻轻摇动，避免局部温度过高。

3、融化后的冷沉淀应在4小时内尽快输用，不可再重新冻存。

冷沉淀方法

目前全国各地血站制备冷沉淀的方法通常有改良快速融化离心法和虹吸法两种。

快速融化离心法

制备方法:等带压缩机的恒温循环解冻箱温度降至4℃，而后将新鲜冰冻血浆放入水浴解冻箱，待新鲜冰冻血浆融化到一半多的时，将还未融化的血浆捏散成碎冰块，以加速其溶解。调控解冻箱温度恒定在4℃继续融化。约2小时后，待新鲜冰冻血浆尚存少许碎冰块时及时取出, 离心10min, 离心力3000g，温度0℃。在净化室内100级净化台上操作分离出上层血浆，下层(25mL±5 mL)血浆和白色沉淀物即为冷沉淀，将其快速置于低温冰箱中保存备用。

水浴虹吸法

制备方法:将新鲜冰冻血浆置于4℃恒温循环解冻箱中，空联袋悬于箱外，两袋之间产生一定的落差。冰冻血浆融化时，由于虹吸的作用，融化的血浆流入空袋中，剩余的20~30mL有白色结晶颗粒的血浆块即为冷沉淀，将其快速置于低温冰箱中保存备用。

比较

在制备时间上，由于改良快速融化离心法加入了捏碎步骤，缩短了融化过程，从而抵消了离心增加的时间，因此与水浴虹吸法时间相差不大。

在冷沉淀的容量控制上，改良快速融化离心法比水浴虹吸法人为影响因素多，且操作过程比较复杂。

综上所述，水浴虹吸法步骤精简，人为因素影响小，所需仪器少而便宜。因此，虹吸法制备冷沉淀逐步变得越来越流行。